Комплексный подход к разработке референсных показателей для оценки функции тромбоцитов на начальном этапе исследования

Обоснование. Тромбоцитопатии являются актуальной проблемой в педиатрической практике. Нарушения функции тромбоцитов клинически проявляются как тромботические и геморрагические события различной степени тяжести и локализации. Оценить функцию тромбоцитов можно с помощью агрегатометрии. Нормативные параметры для агрегатометрии могут использоваться в педиатрической практике в качестве стандарта для оценки функционирования тромбоцитов в периферической крови. Подобные исследования у детей в Российской Федерации ранее не осуществлялись.

Цель исследования — обосновать значимость разработки референсных интервалов (РИ) для агрегатометрии тромбоцитов в педиатрии.

Методы. В исследовании приняли участие 30 условно здоровых пациентов в возрасте от 1 до 18 лет. Лабораторные методы обследования включали клинический анализ крови на автоматическом гематологическом анализаторе. Агрегацию тромбоцитов в цельной крови исследовали с помощью импедансного агрегометра, показатели плазменного звена гемостаза (протромбин по Квику), активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ), тромбиновое время (ТВ), фибриноген — на автоматическом коагулографе, молекулярно-генетическое исследование полиморфизмов в генах тромбоцитарного звена гемостаза проводилось методом ПЦР с детекцией в режиме реального времени. Для исследования агрегации тромбоцитов использовались несколько индукторов: активатор рецепторов тромбина (TRAP-тест), аденозиндифосфорная кислота (АДФ), арахидоновая кислота (ASPI-тест). Инструментальные методы исследования включали электрокардиографию, ультразвуковое исследование органов брюшной полости, мочевыделительной системы, щитовидной железы.

Результаты. В исследование были включены 16 девочек и 14 мальчиков. Медиана возраста составила 9,4, межквартильный интервал (IQR) — 6,5; 14,1. В результате исследования для каждого индуктора агрегации (тромбин, АДФ, арахидоновая кислота) были определены РИ показателей агрегации тромбоцитов.

Заключение. Полученные данные позволят в дальнейшем, основываясь на результатах проводимого исследования, оптимизировать подход к диагностике нарушений функции тромбоцитов с учетом установленных референсных интервалов. Результаты дальнейшего исследования могут способствовать разработке алгоритма контроля антиагрегантной терапии для пациентов, имеющих противопоказания или генетически обусловленную низкую чувствительность к ингибиторам агрегации тромбоцитов на основе ацетилсалициловой кислоты.

1. Мазуров А.В. Физиология и патология тромбоцитов: монография. — М.: Литтерра; 2011. — 456 с.

2. Свешникова А.Н., Якушева А.А. Рябых О.Е. и др. Современные представления о регуляции тромбоцитарного гемостаза // Креативная кардиология. — 2018. — Т. 12. — № 3. — С. 260–274. — doi: https://doi.org/10.24022/1997-3187-201812-3-260-274

3. Васина Л.В., Петрищев Н.Н., Власов Т.Д. Эндотелиальная дисфункция и ее основные маркеры // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. — 2017. — Т. 16. — № 1. — С. 4–15. — doi: https://doi.org/10.24884/1682-6655-201716-1-4-15

4. Савченко А.П., Медведев И.Н. Механизмы функционирования тромбоцитарного гемостаза // Фундаментальные исследования. — 2009. — № 10. — С. 28–30.

5. Карахалис Н.Б., Ефимочкин Г.А., Шадрин А.К., Синьков С.В. Антитромботическая терапия у детей // Анестезиология и реаниматология. — 2018. — Т 63. — № 1. — С. 46–55. — doi: http://doi.org/10.18821/0201-7563-2018-63-1-46-55

6. CLSI. Defining, Establishing, and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory: Approved Guideline. 3rd ed. CLSI document C28-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2008.

7. C LSI. Collection, Transport, and Processing of Blood Specimens for Testing Plasma-Based Coagulation Assays and Molecular Hemostasis Assays: Approved Guideline, 5th ed. CLSI document H21-A5. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2008.

8. ГОСТ Р 15195-2006 «Лабораторная медицина. Требования к лабораториям референтных изменений». Дата введения 01.01.2008. Доступно по: https://docs.cntd.ru/document/1200053110. Ссылка активна на 17.09.2022.

9. Г ОСТ Р 53022.1-2008 «Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа». Дата введения 01.01.2010. Доступно по: https://docs.cntd.ru/document/1200069395. Ссылка активна на 17.09.2022.

10. Детская гематология: клинические рекомендации / под ред. А.Г. Румянцева, А.А. Масчана, Е.В. Жуковской. — М.: ГЭОТАРМедиа; 2015. — 656 с.

11. Ling LQ, Liao J, Niu Q, et al. Evaluation of an automated light transmission aggregometry. Platelets. 2017;28(7):712–719. doi: https://doi.org/10.1080/09537104.2016.1265923

12. Петрова О.В., Шашин С.А., Тарасов Д.Г. Референтные значения агрегации тромбоцитов при исследовании импедансным методом с аденозиндифосфорной кислотой на агрегометре Multiplate // Современные технологии в медицине. — 2016. — Т. 8. — № 3. — С. 100–104. — doi: http://doi.org/10.17691/stm2016.8.3.11

13. NCCLS. How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory: Approved Guideline. 2nd ed. NCCLS document C28-A2. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2000.

14. H alimeh S, Angelis G, Sander A, et al. Multiplate® Whole Blood Impedance Point of Care Aggregometry Preliminary Reference Values in Healthy Infants, Children and Adolescents. Klin Padiatr. 2010;222(3):158–163. doi: https://doi.org/10.1055/s-0030-1249081

15. Ковальчук Ю.П., Кадинская М.И., Пименов М.С., Ефимова И.Ю. Определение референсных значений для анализа агрегации тромбоцитов в автоматическом режиме на анализаторе Sysmex CS-5100 // Медицинский алфавит. — 2021. — № 13. —

16. С. 42–46. — doi: https://doi.org/10.33667/2078-5631-2021-1342-46

17. Platton S, McCormick Á, Bukht M, et al. A multicenter study to evaluate automated platelet aggregometry on Sysmex CS-series coagulation analyzers-preliminary findings. Res Pract Thromb Haemost. 2018;2(4):778–789. doi: https://doi.org/10.1002/rth2.12140

18. Отто Н.Ю., Сагитова Г.Р., Ледяев М.Я. и др. Тромбозы у детей (клинические случаи) // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. — 2020. — № 2. — С. 182–184. — doi: https://doi.org/10.19163/1994-94802020-2(74)-182-184

19. Online Mendelian Inheritance in Man (OMIM). In: National Library of Medicine. 15 Sep 2022. Available online https://www.ncbi.nlm.nih.gov/omim. Accessed on September 16, 2022.

20. Мансурова Д.А., Жунуспекова А.С., Каражанова Л.К. Референсные значения агрегации тромбоцитов у здоровых лиц // Клиническая лабораторная диагностика. — 2018. — Т. 63. — № 9. — С. 549–552. — doi: http://doi.org/10.18821/08692084-2018-63-9-549-552