ppharmПедиатрическая фармакологияPediatric pharmacology1727-57762500-3089Издательство «ПедиатрЪ»10.15690/pf.v20i2.2530ppharm-2280Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИORIGINAL ARTICLESКомплексный подход к разработке референсных показателей для оценки функции тромбоцитов на начальном этапе исследованияComprehensive Approach to Developing Baseline Reference Ranges for Platelet Functionhttps://orcid.org/0000-0001-8311-9506ГордееваО. Б.GordeevaOlga B.

Гордеева Ольга Борисовна, кандидат медицинских наук, заведующая отделом научных основ гемостаза; доцент кафедры факультетской педиатрии педиатрического факультета

119333, г. Москва, ул. Фотиевой, д. 10, стр. 1 

тел./факс: +7 (495) 427-55-77, тел.: +7 (963) 782-02-06

Olga B. Gordeeva, MD, PhD

10, build 1, Fotievoy street, Moscow, 119333

obr@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9883-0445КарасеваМ. С.KarasevaMaria S.

Карасева Мария Сергеевна 

Москва

Maria S. Karaseva, MD

Moscow

https://orcid.org/0000-0002-3395-2812ЛастовкаВ. А.LastovkaVasily A.

Ластовка Василий Анатольевич, к.м.н.

Москва

Vasiliy A. Lastovka, MD. PhD

Moscow

https://orcid.org/0000-0001-8320-2027ВашакмадзеН. Д.VashakmadzeNato D.

Вашакмадзе Нато Джумберовна, д.м.н., профессор 

Москва

Nato D. Vashakmadze, MD, PhD, Professor

Moscow

https://orcid.org/0000-0002-6150-0880СолошенкоМ. А.SoloshenkoMargarita A.

Солошенко Маргарита Александровна, к.м.н. 

Москва

Margarita A. Soloshenko, MD, PhD

Moscow

https://orcid.org/0000-0001-7834-213XРевуненковГ. В.RevunenkovGregory V.

Ревуненков Григорий Валерьевич, к.м.н. 

Москва

Grigory V. Revunenkov, MD, PhD

Moscow

rgv07@mail.ruВаляловК. А.ValyalovKirill A.

Валялов Кирилл Андреевич 

Москва

Kirill A. Valyalov, MD

Moscow

https://orcid.org/0000-0001-6492-2539АлтунинВ. В.AltuninViktor V.

Алтунин Виктор Викторович, к.м.н. 

Москва

Viktor V. Altunin, MD. PhD

Moscow

НИИ педиатрии и охраны здоровья детей НКЦ №2 ФГБНУ «РНЦХ им. акад. Б.В. Петровского»; РНИМУ им. Н.И. ПироговаРоссияResearch Institute of Pediatrics and Children’s Health in Petrovsky National Research Centre of Surgery; Pirogov Russian National Research Medical UniversityRussian FederationНИИ педиатрии и охраны здоровья детей НКЦ №2 ФГБНУ «РНЦХ им. акад. Б.В. Петровского»РоссияResearch Institute of Pediatrics and Children’s Health in Petrovsky National Research Centre of SurgeryRussian FederationМорозовская ДГКБ ДЗМРоссияMorozovskaya Children’s City HospitalRussian Federation202303052023202102–111Copyright © Гордеева О.Б., Карасева М.С., Ластовка В.А., Вашакмадзе Н.Д., Солошенко М.А., Ревуненков Г.В., Валялов К.А., Алтунин В.В., 20232023Гордеева О.Б., Карасева М.С., Ластовка В.А., Вашакмадзе Н.Д., Солошенко М.А., Ревуненков Г.В., Валялов К.А., Алтунин В.В.Gordeeva O.B., Karaseva M.S., Lastovka V.A., Vashakmadze N.D., Soloshenko M.A., Revunenkov G.V., Valyalov K.A., Altunin V.V.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.pedpharma.ru/jour/article/view/2280Обоснование

Обоснование. Тромбоцитопатии являются актуальной проблемой в педиатрической практике. Нарушения функции тромбоцитов клинически проявляются как тромботические и геморрагические события различной степени тяжести и локализации. Оценить функцию тромбоцитов можно с помощью агрегатометрии. Нормативные параметры для агрегатометрии могут использоваться в педиатрической практике в качестве стандарта для оценки функционирования тромбоцитов в периферической крови. Подобные исследования у детей в Российской Федерации ранее не осуществлялись.

Цель исследования — обосновать значимость разработки референсных интервалов (РИ) для агрегатометрии тромбоцитов в педиатрии.

Методы

Методы. В исследовании приняли участие 30 условно здоровых пациентов в возрасте от 1 до 18 лет. Лабораторные методы обследования включали клинический анализ крови на автоматическом гематологическом анализаторе. Агрегацию тромбоцитов в цельной крови исследовали с помощью импедансного агрегометра, показатели плазменного звена гемостаза (протромбин по Квику), активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ), тромбиновое время (ТВ), фибриноген — на автоматическом коагулографе, молекулярно-генетическое исследование полиморфизмов в генах тромбоцитарного звена гемостаза проводилось методом ПЦР с детекцией в режиме реального времени. Для исследования агрегации тромбоцитов использовались несколько индукторов: активатор рецепторов тромбина (TRAP-тест), аденозиндифосфорная кислота (АДФ), арахидоновая кислота (ASPI-тест). Инструментальные методы исследования включали электрокардиографию, ультразвуковое исследование органов брюшной полости, мочевыделительной системы, щитовидной железы.

Результаты

Результаты. В исследование были включены 16 девочек и 14 мальчиков. Медиана возраста составила 9,4, межквартильный интервал (IQR) — 6,5; 14,1. В результате исследования для каждого индуктора агрегации (тромбин, АДФ, арахидоновая кислота) были определены РИ показателей агрегации тромбоцитов.

Заключение

Заключение. Полученные данные позволят в дальнейшем, основываясь на результатах проводимого исследования, оптимизировать подход к диагностике нарушений функции тромбоцитов с учетом установленных референсных интервалов. Результаты дальнейшего исследования могут способствовать разработке алгоритма контроля антиагрегантной терапии для пациентов, имеющих противопоказания или генетически обусловленную низкую чувствительность к ингибиторам агрегации тромбоцитов на основе ацетилсалициловой кислоты.

Background

Background. Thrombocytopathies are topical issues of pediatrics. Platelet dysfunction clinically manifests as thrombotic and hemorrhagic events of various severity and location. Platelet function can be evaluated via aggregatometry. Specified parameters for aggregatometry can be used in pediatrics as a standard for evaluating platelet function in peripheral blood. There were no similar studies in children in Russian Federation.

Objective

Objective. The aim of the study is — to justify the significance of reference ranges (RR) development for platelet aggregatometry in pediatrics.

Methods

Methods. The study included 30 relatively healthy patients aged from 1 to 18 years. Laboratory tests included complete blood count via automatic hematological analyzer; platelet aggregation in whole blood was evaluated via impedance aggregometer; plasmic hemostasis component (Quick prothrombin), activated partial thromboplastin time (APTT), thrombin time (TT), and fibrinogen were evaluated on automatic coagulation analyzer; molecular genetic study of platelet genes polymorphisms was performed via real-time PCR. Several inducers were used to study platelet aggregation: thrombin receptor activating peptide (TRAP), adenosine diphosphate (ADP), arachidonic acid (ASPI). Instrumental methods included electrocardiography, ultrasound of abdomen, urinary system, and thyroid gland.

Results

Results. The study included 16 girls and 14 boys. The median age was 9.4, interquartile range (IQR) was 6.5; 14,1. RR for platelet aggregation indicators were determined for all aggregation inducers (thrombin, ADP, arachidonic acid) as a result of the study.

Conclusion

Conclusion. The obtained data will allow to improve the diagnosis approach for platelet dysfunction regarding the established reference ranges. The results of further research may contribute in the development of the algorithm for controlling antiplatelet therapy in patients with contraindications or with genetically determined low sensitivity to thrombocyte aggregation inhibitors based on acetylsalicylic acid.

тромбоцитыагрегацияреференсные интервалыгемостазантиагрегантыдетитромбозтромбоцитопатияагрегометрplateletsaggregationreference rangeshemostasisantiaggregantschildrenthrombosistrombocytopathyaaggregometerReferencesМазуров А.В. Физиология и патология тромбоцитов: монография. — М.: Литтерра; 2011. — 456 с.Mazurov A.V. Fiziologiya i patologiya trombotsitov: Monography. Moscow: Litterra; 2011. 456 p. (In Russ).]Свешникова А.Н., Якушева А.А. Рябых О.Е. и др. Современные представления о регуляции тромбоцитарного гемостаза // Креативная кардиология. — 2018. — Т. 12. — № 3. — С. 260–274. — doi: https://doi.org/10.24022/1997-3187-201812-3-260-274Sveshnikova AN, Yakusheva AA, Ryabykh AA, et al. Modern views on the regulation of platelet-dependent hemostasis. Creative Cardiology. 2018;12(3):260–274. (In Russ). doi: https://doi.org/10.24022/1997-3187-2018-12-3-260-274]Васина Л.В., Петрищев Н.Н., Власов Т.Д. Эндотелиальная дисфункция и ее основные маркеры // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. — 2017. — Т. 16. — № 1. — С. 4–15. — doi: https://doi.org/10.24884/1682-6655-201716-1-4-15Vasina LV, Petrishchev NN, Vlasov TD. Markers of endothelial dysfunction. Regional blood circulation and microcirculation. 2017;16(1):4–15. (In Russ). doi: https://doi.org/10.24884/1682-6655-2017-16-1-4-15]Савченко А.П., Медведев И.Н. Механизмы функционирования тромбоцитарного гемостаза // Фундаментальные исследования. — 2009. — № 10. — С. 28–30.Savchenko AP, Medvedev IN. Mekhanizmy funktsionirovaniya trombotsitarnogo gemostaza. Fundamental’nye issledovaniya. 2009;(10):28–30. (In Russ).]Карахалис Н.Б., Ефимочкин Г.А., Шадрин А.К., Синьков С.В. Антитромботическая терапия у детей // Анестезиология и реаниматология. — 2018. — Т 63. — № 1. — С. 46–55. — doi: http://doi.org/10.18821/0201-7563-2018-63-1-46-55Karakhalis NB, Efimochkin GA, Shadrin AK, Sinkov SV. Antithrombotic Therapy in Children. Anesteziologiya I Reanimatologiya = Russian Journal of Anaesthesiology and Reanimatology. 2018;63(1):46–55. (In Russ). doi: http://doi.org/10.18821/0201-7563-2018-63-1-46-55]CLSI. Defining, Establishing, and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory: Approved Guideline. 3rd ed. CLSI document C28-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2008.CLSI. Defining, Establishing, and Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory: Approved Guideline. 3rd ed. CLSI document C28-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2008.C LSI. Collection, Transport, and Processing of Blood Specimens for Testing Plasma-Based Coagulation Assays and Molecular Hemostasis Assays: Approved Guideline, 5th ed. CLSI document H21-A5. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2008.CLSI. Collection, Transport, and Processing of Blood Specimens for Testing Plasma-Based Coagulation Assays and Molecular Hemostasis Assays: Approved Guideline, 5th ed. CLSI document H21-A5. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2008.ГОСТ Р 15195-2006 «Лабораторная медицина. Требования к лабораториям референтных изменений». Дата введения 01.01.2008. Доступно по: https://docs.cntd.ru/document/1200053110. Ссылка активна на 17.09.2022.All Union State Standard Р 15195-2006 “Laboratory medicine. Requirements for reference measurements laboratories”. Date of validity January 01, 2008. (In Russ).] Доступно по: https://docs.cntd.ru/document/1200053110. Ссылка активна на 17.09.2022.Г ОСТ Р 53022.1-2008 «Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа». Дата введения 01.01.2010. Доступно по: https://docs.cntd.ru/document/1200069395. Ссылка активна на 17.09.2022.All Union State Standard Р 53022.1-2008 “Medical laboratory technologies. Requirements for quality of clinical laboratory tests. Part 4. Rules for development of requirements for timeliness of laboratory information submitting”. Date of validity January 01, 2010. (In Russ).] Доступно по: https://docs.cntd.ru/document/1200069395. Ссылка активна на 17.09.2022.Детская гематология: клинические рекомендации / под ред. А.Г. Румянцева, А.А. Масчана, Е.В. Жуковской. — М.: ГЭОТАРМедиа; 2015. — 656 с.Detskaya gematologiya: Clinical guidelines. Rumyantsev AG, Maschan AA, Zhukovskaya EV, eds. Moscow: GEOTAR-Media; 2015. 656 p. (In Russ).]Ling LQ, Liao J, Niu Q, et al. Evaluation of an automated light transmission aggregometry. Platelets. 2017;28(7):712–719. doi: https://doi.org/10.1080/09537104.2016.1265923Ling LQ, Liao J, Niu Q, et al. Evaluation of an automated light transmission aggregometry. Platelets. 2017;28(7):712–719. doi: https://doi.org/10.1080/09537104.2016.1265923Петрова О.В., Шашин С.А., Тарасов Д.Г. Референтные значения агрегации тромбоцитов при исследовании импедансным методом с аденозиндифосфорной кислотой на агрегометре Multiplate // Современные технологии в медицине. — 2016. — Т. 8. — № 3. — С. 100–104. — doi: http://doi.org/10.17691/stm2016.8.3.11Petrova ОV, Shashin SА, Tarasov DG. Reference values of platelet aggregation in impedance aggregometry with adenosine diphosphoric acid on aggregometer multiplate. Sovremennye tehnologii v medicine. 2016;8(3):100–104. (In Russ). doi: http://doi.org/10.17691/stm2016.8.3.11]NCCLS. How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory: Approved Guideline. 2nd ed. NCCLS document C28-A2. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2000.NCCLS. How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory: Approved Guideline. 2nd ed. NCCLS document C28-A2. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2000.H alimeh S, Angelis G, Sander A, et al. Multiplate® Whole Blood Impedance Point of Care Aggregometry Preliminary Reference Values in Healthy Infants, Children and Adolescents. Klin Padiatr. 2010;222(3):158–163. doi: https://doi.org/10.1055/s-0030-1249081H alimeh S, Angelis G, Sander A, et al. Multiplate® Whole Blood Impedance Point of Care Aggregometry Preliminary Reference Values in Healthy Infants, Children and Adolescents. Klin Padiatr. 2010;222(3):158–163. doi: https://doi.org/10.1055/s-0030-1249081Ковальчук Ю.П., Кадинская М.И., Пименов М.С., Ефимова И.Ю. Определение референсных значений для анализа агрегации тромбоцитов в автоматическом режиме на анализаторе Sysmex CS-5100 // Медицинский алфавит. — 2021. — № 13. —Kovalchuk YuP, Kadinskaya MI, Pimenov MS, Efimova IYu. Determination of reference ranges for automated platelet aggregometry on Sysmex CS-5100 analyzer. Medical alphabet.С. 42–46. — doi: https://doi.org/10.33667/2078-5631-2021-1342-46;(13):42–46. (In Russ). doi: https://doi.org/10.33667/2078-5631-2021-13-42-46]Platton S, McCormick Á, Bukht M, et al. A multicenter study to evaluate automated platelet aggregometry on Sysmex CS-series coagulation analyzers-preliminary findings. Res Pract Thromb Haemost. 2018;2(4):778–789. doi: https://doi.org/10.1002/rth2.12140Platton S, McCormick Á, Bukht M, et al. A multicenter study to evaluate automated platelet aggregometry on Sysmex CS-series coagulation analyzers-preliminary findings. Res Pract Thromb Haemost. 2018;2(4):778–789. doi: https://doi.org/10.1002/rth2.12140Отто Н.Ю., Сагитова Г.Р., Ледяев М.Я. и др. Тромбозы у детей (клинические случаи) // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. — 2020. — № 2. — С. 182–184. — doi: https://doi.org/10.19163/1994-94802020-2(74)-182-184Otto NYu, Sagitova GR, Ledyaev MYa, et al. Thrombosis in children (clinical cases). Journal of Volgograd State Medical University. 2020;(2):182–184. (In Russ). doi: https://doi.org/10.19163/1994-9480-2020-2(74)-182-184]Online Mendelian Inheritance in Man (OMIM). In: National Library of Medicine. 15 Sep 2022. Available online https://www.ncbi.nlm.nih.gov/omim. Accessed on September 16, 2022.Online Mendelian Inheritance in Man (OMIM). In: National Library of Medicine. 15 Sep 2022. Available online https://www.ncbi.nlm.nih.gov/omim. Accessed on September 16, 2022.Мансурова Д.А., Жунуспекова А.С., Каражанова Л.К. Референсные значения агрегации тромбоцитов у здоровых лиц // Клиническая лабораторная диагностика. — 2018. — Т. 63. — № 9. — С. 549–552. — doi: http://doi.org/10.18821/08692084-2018-63-9-549-552Mansurova JA, Zhunuspekova AS, Karazhanova LK. Reference values of platelet aggregometry in healthy subjects. Klinicheskaya Laboratornaya Diagnostika = Russian Clinical Laboratory Diagnostics. 2018;63(9):549–552. (In Russ). doi: http://doi.org/10.18821/0869-2084-2018-63-9-549-552]

The authors declare that there are no conflicts of interest present.